【摘 要】
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根据发表的犬瘟热病毒OP-CDV毒株序列设计两对引物,以犬瘟热病毒OP-CDV株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板,做RT-PCR扩增出H基因的5＇端和3＇端大小为945bp、904bp的两个片段
【机 构】
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扬州大学畜牧兽医学院,山东农业大学动物科技学院
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根据发表的犬瘟热病毒OP-CDV毒株序列设计两对引物,以犬瘟热病毒OP-CDV株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板,做RT-PCR扩增出H基因的5＇端和3＇端大小为945bp、904bp的两个片段,两片段部分重叠,覆盖了H基因的全部编码序列.将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX-6p-1载体中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,将重组质粒转化进宿主菌BL21中,在37℃1.0mM IRTG诱导下,H基因分段获得了良好的表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定其表达的融合蛋白质大
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