【摘 要】
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目的探讨多巴胺诱导黑素细胞PIG1凋亡的机制。方法利用300μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L和1500μmol/L多巴胺处理黑素细胞PIG124小时后,以结晶紫法检测细胞活性变化,利用
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军皮肤性病研究所
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目的探讨多巴胺诱导黑素细胞PIG1凋亡的机制。方法利用300μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L和1500μmol/L多巴胺处理黑素细胞PIG124小时后,以结晶紫法检测细胞活性变化,利用流式细胞术分析AnnexinⅤ/PI双荧光标记细胞的凋亡变化。500μmol/L多巴胺处理黑素细胞1h、3h、6h和12h后收集细胞全蛋白,免疫印迹法检测双链RNA依赖的蛋白激酶PKR、磷酸化双链RNA依赖的蛋白激酶P-PKR和磷酸化真核细胞蛋白质翻译起始因子P-eIF2α水平变化。结果细胞活性随着多巴胺浓度升高而降低,呈剂量依赖关系(P<0.01)。细胞凋亡随多巴胺浓度升高而增加,并呈剂量依赖关系。500μmol/L多巴胺处理后PKR水平未发生明显变化,PKR和eIF2α磷酸化水平明显增加。结论多巴胺诱导的黑素细胞凋亡与PKR通路的激活相关。
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