【摘 要】
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目的采用小动物专用高场MR(7.0 T)观察超顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIO)标记的骨髓内皮祖细胞(EPCs)归巢至肿瘤局部的情况。方法抽取荷瘤鼠腹腔积液,直接注射法种植于15只裸鼠肝脏,制作小鼠移植性H22 HCC模型;取C57BL/6小鼠骨髓分离培养EPCs,用25 μg/ml纳米铁复合物(SPIO-PLL)对第三代EPCs进行标记;利用MTT比色实验、流式细胞分析检测磁性标记对细胞生长、凋亡
【机 构】
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目的采用小动物专用高场MR(7.0 T)观察超顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIO)标记的骨髓内皮祖细胞(EPCs)归巢至肿瘤局部的情况。
方法抽取荷瘤鼠腹腔积液,直接注射法种植于15只裸鼠肝脏,制作小鼠移植性H22 HCC模型;取C57BL/6小鼠骨髓分离培养EPCs,用25 μg/ml纳米铁复合物(SPIO-PLL)对第三代EPCs进行标记;利用MTT比色实验、流式细胞分析检测磁性标记对细胞生长、凋亡的影响。模型制作第3天将标记细胞经尾静脉移植至模型鼠(n=15)及对照组(n=6)体内,移植后第1、3、7天应用MR观察肿瘤信号改变情况。行铁蓝染色、CD31免疫组织化学检查,并将MR所见与病理切片行对照分析。采用两样本t检验分析数据。
结果模型制作3 d后,15只裸鼠肝脏均可见肿瘤病灶;MTT比色实验、流式细胞分析示25 μg/ml SPIO-PLL标记细胞后,其生长曲线(t=0.281,P>0.05)、凋亡与未标记细胞间差异未见统计学意义[早期凋亡率:(12.31±1.43)%与(11.57±1.24)%,晚期凋亡率:(0.55±0.07)%与(0.49±0.05)%;t=0.967和1.060,均P>0.05];模型组小鼠细胞移植后第3天,MR成像可见信号改变(4/5),低信号呈斑片、条带状,主要位于肿瘤病灶边缘;第7天信号改变程度减低。病理证实标记细胞归巢至肿瘤周围或肿瘤局部。对照组小鼠MR成像未见明显低信号改变。
结论EPCs可归巢至肿瘤局部或周围,高场MR可对其进行动态观察。
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