【摘 要】
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为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 东北林业大学生命科学学院; 黑龙江省农产品质量检验检测中心; 国家知识产权局专利审查协作北京中心;
【基金项目】
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国家科技支撑计划(2013BAK11B00)
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为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(392 bp)、FCV(922 bp)和FHV-I(290 bp)的多重PCR方法。该检测方法结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测出以上3种病毒,FPV、FCV和FHV的最低检出限分别为101.5TCID50、101.9TCID50和101.2TCID50。以该方法对黑龙江省各地区收集的120份血清进行检测,其中FPV、FCV和FHV-I的阳性率分别为5%(6/120)、2.5%(3/120)和4.1%(5/120),证明该方法可以用于3种病毒的检测,具有良好的特异性和敏感性。
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