【摘 要】
：
目的利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术建立TCR V基因敲除小鼠。方法针对Trbv13-3、Trbv19基因编码序列分别设计向导RNA(single guide RNA,sg RNA),制备相应质粒,将表达sg RNA和
【机 构】
：
陆军军医大学全军免疫研究所; 上海科技大学生命科学与技术学院;
【基金项目】
：
重庆市新产品创新青年科技人材培养计划(stc2013kjrc-qnrc10009)
论文部分内容阅读
目的利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术建立TCR V基因敲除小鼠。方法针对Trbv13-3、Trbv19基因编码序列分别设计向导RNA(single guide RNA,sg RNA),制备相应质粒,将表达sg RNA和cas9蛋白的质粒用Lipo2000转染进小鼠成神经瘤细胞N2A中,通过药物筛选获得细胞库。经过单克隆测序检测细胞库中基因组的突变效率,筛选出效率最佳的sg RNA。体外转录获取sg RNA和Cas9 m RNA,进行小鼠受精卵的显微注射,提取出生的小鼠的基因组DNA进行测序鉴定。结果 6号小鼠Trbv13-3和Trbv19基因各有1个bp的增加和减少,形成移码突变,Trbv13-3和Trbv19基因的表达被破坏。结论成功构建出Trbv13-3和Trbv19基因敲除小鼠,为深入研究Trbv13-3和Trbv19基因与TCR谱系形成的关系提供了小鼠模型。
其他文献
中国经济高速发展推动中厚板产销量大幅增长,介绍了中国中厚板的生产、市场现状与发展,详细阐述了国内中厚板市场现状及国内热处理生产线建设情况及中厚板品种随国家发展趋势
重视哲学社会科学是中国共产党的传统和优势。新民主主义革命时期,中国共产党领导优秀哲学社会科学工作者,在立足中国实际基础上,初步建构起以马克思主义为指导的中国特色哲
30多年的改革开放,是一场伟大的、史无前例的社会变革。中国改革开放向何处去？举什么旗、走什么路？用什么思想理论指导？这些问题都受到了各种社会思潮的高度关注,当代中国各种社
电压灵敏度和热时间常数为表征微测辐射热计热性能的两个重要参数,热绝缘结构尺寸是决定性能参数的首要因素。首先采用解析法计算,并分析了这两个性能参数随结构尺寸改变的规
<正>我从事"唱(唐)诗"的课程化研究和教学实验工作已经整整七年了。在这七年里,我倾注自己全部的身心于这项事业,使之在课程理论、课程实施的各个方面均得以丰满起来。应该说
硫化镉作为一种重要的纳米半导体材料,在光吸收、光催化和传感器等方面有着广泛的应用.文章主要介绍了纳米硫化镉的合成方法及优缺点,并对纳米硫化镉的应用进行了综述.
本文根据生态环境资产负债表的基本概念和理论,提出了生态环境资产负债表编制的总体框架,同时,针对环境容量资产、环境质量产品、生态产品资产的特点,分别建立了相应框架体系
开展党章学习教育既是中国共产党的优良传统,也是加强党的思想理论建设的一项基础性工作。1946年初,为贯彻七大会议精神,中共以陕甘宁边区为中心开展了对七大党章的系统学习,
综述了2,2-二氟乙醇的性质,并讨论了在农药、医药,含氟聚合物等中的应用,同时分析了一些含2,2-二氟乙氧基化合物的特性及应用。