桑树光合系统ⅠpsaE基因的克隆及表达分析

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利用桑树(Morus L.)表达序列标签(EST),采用RT-PCR方法克隆了桑树光合系统Ⅰ(PSⅠ)psaE基因的全长cDNA序列,命名为MpsaE(GenBank登录号:GU645972).序列分析表明,该基因序列全长705 bp,存在97 bp的5′端非翻译区和170 bp的3′端非翻译区,其开放阅读框(ORF)长438 bp,编码含有146个氨基酸的蛋白,预测蛋白分子质量为15.38 kD,等电点为8.08.同源性分析表明,MpsaE编码蛋白与柑桔(Citrus sinensis)、毛果杨甙(Populus trichocarpa)和欧美杨(Populus euramericana)psaE基因编码的蛋白具有较高的同源性,相似性达到98%.基于MpsaE与其它18个物种的psaE基因编码氨基酸序列构建的系统进化树显示,桑树与柑桔、蓖麻(Ricinus)、毛果杨甙和欧美杨的亲缘关系较近.半定量RT-PCR分析表明,MpsaE基因mRNA在桑树不同组织及部位的转录水平有明显差异:在叶片中的转录水平较高,其中幼叶(刚展开的第1片叶)和中部叶片(8-10位叶)的转录水平最高,其次为上部叶片(2-3位叶)、顶芽和下部叶片;在根部的转录水平最低.初步推测MpsaE基因是桑树PSⅠ参与某些光合生理反应的一个亚基.
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