【摘 要】
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Argonaute7 (AGO7)在植物叶和花发育过程中发挥着重要的调控作用,而AGO7蛋白如何参与调控龙眼体胚的发育却未见报道。为了深入研究龙眼AGO7基因的功能与调控作用,本研究基于龙眼基因组数据库,采用RT-PCR法克隆龙眼DlAGO7基因,对其进行生物信息学分析,构建瞬时融合表达载体,明确其亚细胞定位,最后,利用实时荧光定量仪检测其在龙眼体胚不同阶段的相对表达情况。克隆获得DlAGO7的C
【基金项目】
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漳州市自然科学基金项目(ZZ2021J16); 漳州卫生职业学院高学历人才科研支持专项(ZWYGXL202101); 漳州卫生职业学院科技创新团队培育项目(Kjcx-3、Kjcx-5); 福建农林大学科技创新专项基金(CXZX2017189)共同资助;
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Argonaute7 (AGO7)在植物叶和花发育过程中发挥着重要的调控作用,而AGO7蛋白如何参与调控龙眼体胚的发育却未见报道。为了深入研究龙眼AGO7基因的功能与调控作用,本研究基于龙眼基因组数据库,采用RT-PCR法克隆龙眼DlAGO7基因,对其进行生物信息学分析,构建瞬时融合表达载体,明确其亚细胞定位,最后,利用实时荧光定量仪检测其在龙眼体胚不同阶段的相对表达情况。克隆获得DlAGO7的CDS序列为3 060 bp,编码1 019个氨基酸;所编码氨基酸序列含有PAZ和Piwi高度保守结构域,BlastP序列比对分析表明,DlAGO7蛋白与其他植物的AGO7蛋白具有高度同源性,系统进化发育树分析显示,DlAGO7蛋白与甜橙AGO7蛋白亲缘关系最近,与单子叶植物玉米和水稻的亲缘关系最远;亚细胞定位研究可知,龙眼DlAGO7基因为核定位基因;qRT-PCR分析表明,DlAGO7在龙眼球形胚阶段显著表达;克隆获得DlAGO7基因的5′端上游启动子序列长度为1 746 bp,启动子分析共预测出9类顺式作用元件。由此推测,DlAGO7基因可能在龙眼球形胚阶段发挥着重要的调空作用,该基因主要在细胞核中发挥作用。以上研究结果可为龙眼的分子育种提供理论基础。
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