建立液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LCMS/MS)测定血清胆固醇酯n-3脂肪酸(CE-n-3 FA)的方法,以进行营养监测和心血管疾病危险分析。
方法本研究为方法学建立及评价。2012年1—8月征集111名北京地区健康志愿者(年龄19~72岁),其中男55名,女56名。建立各胆固醇酯(CEs)质谱测定条件,异丙醇提取血清CEs,稀释后用LC-MS/MS分析各种CEs,归一化法定量。评价新方法的精密度。用新建立的LC-MS/MS方法测定血清CE-n-3 FA含量,同时用试剂盒测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)。用Spearman相关分析CE-n-3 FA与年龄、体质指数(BMI)、TG、HDL-C、LDL-C和hs-CRP的关系。
结果样本分析在5 min内完成,11种主要CEs分离良好;CE20∶5和CE22∶6平均批内CV分别为1.6%~2.3%和1.5%~2.3%,总CV分别为3.9%~7.6%和3.5%~7.4%,未见明显干扰因素。111名健康志愿者血清分析结果显示,CE20∶5和CE22∶6均呈正偏态分布(偏度分别为1.81和1.09;峰度分别为4.50和1.40),中位数分别为0.37%(0.13%~1.26%)和0.50%(0.29%~0.94%)。CE20∶5与年龄、TG、TC、hs-CRP呈正相关(P<0.05)。
结论成功建立了LC-MS/MS测定血清CE-n-3 FA含量的方法,有望用于营养监测,CE-n-3 FA与心血管疾病的关系还有待进一步研究。(中华检验医学杂志,2013,36:146-150)