可溶性重组全长人PPARγ的表达、纯化及功能表征

来源 :世界科技研究与发展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanzedong
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目的建立可溶性表迭、纯化有活性的重组全长人PPARγ蛋白的方法?方法构建pReceiver-B13-SUMO-PPARγ质粒转化至Escherichia coli BL21(DE3)细胞,进行诱导表达,优化细胞生长环境;利用亲和色谱法纯化可溶性重组全长人PPARl蛋白;以罗格列酮为阳性配体,以GW9662为拮抗剂,采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定重组全长人PPARγ蛋白与配体药物的结合活性。结果在优化条件(16℃、IPTG浓度0.4mM、诱导时间18~20h)下能获得高水平、可溶
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