【摘 要】
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目的考察烷基化低分子量聚乙烯亚胺作为基因递送载体的安全性和有效性。方法以1-溴十二烷和分子量为1800的分枝状PEI(b PEI1.8K)为原料,合成b PEI1.8K-C12,并用1H-NMR对其结
【机 构】
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中国医学科学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室,延边大学附属医院呼吸内科
【基金项目】
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北京市自然科学基金(7142114;2141004);国家自然科学基金(81373342);协和青年科研基金学生创新项目(2012-1007-017)
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目的考察烷基化低分子量聚乙烯亚胺作为基因递送载体的安全性和有效性。方法以1-溴十二烷和分子量为1800的分枝状PEI(b PEI1.8K)为原料,合成b PEI1.8K-C12,并用1H-NMR对其结构进行确认;采用MTT法考察b PEI1.8K-C12的细胞毒性;红细胞溶血实验考察b PEI1.8K-C12的生物相容性;测定b PEI1.8K-C12/DNA复合颗粒的粒径分布和zeta电位;采用激光共聚焦显微镜观察b PEI1.8K-C12/DNA复合颗粒的细胞摄取行为;采用琼脂糖凝胶阻滞电泳考察b PEI1.8K-C12对DNA的固缩能力;并用荧光素酶报告基因和绿色荧光蛋白报告基因考察b PEI1.8K-C12的体外转染效率。结果经1H-NMR确认,成功合成了b PEI1.8K-C12;MTT结果表明b PEI1.8K-C12对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性与b PEI1.8K相当;红细胞溶血实验结果表明高浓度b PEI1.8K-C12静脉注射时具有潜在溶血性;质量比相同时,b PEI1.8K-C12/DNA复合颗粒的平均粒径和zeta电位均比相应的b PEI1.8K/DNA大;烷基化修饰后,b PEI1.8K-C12对DNA的固缩能力降低,MCF-7细胞对b PEI1.8K-C12/DNA复合颗粒的摄取效率大大增加,b PEI1.8K-C12递送报告基因质粒的体外转染效率显著高于b PEI1.8K,甚至与lipofectamine2000相当。结论 b PEI1.8K-C12是一种安全高效的基因递送载体,具有较高的进一步开发前景。
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