【摘 要】
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[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)CFT073株的双组分信号系统KguS/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条
【机 构】
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齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院/山东省微生物工程重点实验室,山东省临沂市相公中心医院,山东省农业科学院农产品研究所
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2017YFC1601404);山东省自然科学基金项目(ZR2018LC003);国家自然科学基金项目(31470243);山东省重点研发计划项目(2014GSF120006);山东省研究生教育创新计划项目(SDYY14024)
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[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)CFT073株的双组分信号系统KguS/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒pCP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc 5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌
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