【摘 要】
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对全长猪卵透明带-3β(pZP3β)cDNA的5端重新测序分析,发现文献报道的该克隆基因5端非编码序列中漏读了两个碱基,继而选择符合pZP3βcDNA阅读框的pWR450-2载体质粒,通过双酶切构建了β-半乳糖苷酶/pZP3β融合蛋白
【机 构】
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上海市计划生育科学研究所,复旦大学遗传工程国家重点实验室
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对全长猪卵透明带-3β(pZP3β)cDNA的5端重新测序分析,发现文献报道的该克隆基因5端非编码序列中漏读了两个碱基,继而选择符合pZP3βcDNA阅读框的pWR450-2载体质粒,通过双酶切构建了β-半乳糖苷酶/pZP3β融合蛋白基因的细菌表达质粒。转化宿主菌后用IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明pZP3β融合蛋白在E.coli中获得表达,并在蛋白印迹鉴定中能同兔抗猪ZPIgG呈特异性免疫反应。
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