转甲状腺素蛋白基因在毕赤氏酵母中的非融合表达

来源 :复旦学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liweibin522

【摘要】

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用限制酶将pSK-TTR质粒上TTR基因切下，分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K，将重组的pPIC9K-TTR用BglⅡ酶切后，转化pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子，转化子经摇

【作者】

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翟杰高卜渝等

【机构】

：

复旦大学生命科学院

【出处】

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复旦学报：自然科学版

【发表日期】

：

2002年6期

【关键词】

：

转甲状腺素蛋白基因分泌型载体毕赤氏酵母蛋白质印迹 transthyretin gene secretion vector Pichia pastori

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(39970019)

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用限制酶将pSK-TTR质粒上TTR基因切下，分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K，将重组的pPIC9K-TTR用BglⅡ酶切后，转化pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子，转化子经摇瓶发酵，上清液用SDS-PAGE检测，有明显的rTTR表达，经DEAE-sepharose F.F.离子交换柱和Superdex75分子筛层析，得到蛋白线纯度大于95%的rTTR，经Western Boltting，分子质量和等电点测定等证明，毕赤氏酵母的表达rTTR与人血浆提取的

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