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用限制酶将pSK-TTR质粒上TTR基因切下,分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K,将重组的pPIC9K-TTR用BglⅡ酶切后,转化pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,转化子经摇瓶发酵,上清液用SDS-PAGE检测,有明显的rTTR表达,经DEAE-sepharose F.F.离子交换柱和Superdex75分子筛层析,得到蛋白线纯度大于95%的rTTR,经Western Boltting,分子质量和等电点测定等证明,毕赤氏酵母的表达rTTR与人血浆提取的