【摘 要】
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目的 确定A类清道夫受体胞浆域中的信号序列,探讨其对于受体功能的影响.方法 构建A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体的表达质粒,并将其经脂质体介导瞬时转染入C
【机 构】
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南京医科大学动脉粥样硬化研究中心,江苏省功能基因组学重点实验室,江苏省,南京市,210029
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目的 确定A类清道夫受体胞浆域中的信号序列,探讨其对于受体功能的影响.方法 构建A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体的表达质粒,并将其经脂质体介导瞬时转染入CH0细胞中.用Western blot检测A类清道夫受体在细胞中的表达,并用流式细胞仪定量检测转染后的蛋白表达效率.用DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白与转染的细胞共孵育,激光共聚焦显微镜下观察乙酰化低密度脂蛋白在细胞内的分布,并进行荧光定量分析.结果 A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体可大量表达于转染细胞膜和细胞浆.在高浓度乙酰化低密度脂蛋白刺激下,A类清道夫受体N端第1～27位氨基酸胞浆结构域缺失体的细胞内定位发生变化,也可存在于转染细胞核内.A类清道夫受体N端第1～2位氨基酸胞浆结构域缺失体摄取DiI标记乙酰化低密度脂蛋白的能力较全长相比下降约60%,细胞粘附能力较全长A类清道夫受体相比则下降约8.9%.结论 A类清道夫受体的N端第1～27位氨基酸结构对于A类清道夫受体在细胞内的定位表达、结合和摄取配体以及调节细胞粘附的功能具有重要的作用.
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