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目的 研究建立人精浆中L-肉毒碱HPLC测定方法,分析正常生育男性及弱精症不育患者精浆中L-肉毒碱水平差异及其临床意义.方法 精浆样品经乙腈沉淀蛋白、衍生化反应后,以Lichrospher SiO2为固定相,乙腈-柠檬酸缓冲液(内含三乙胺12 mmol/L;pH 5.0)为流动相进行色谱等度分离,260 nm波长下定量检测,并对30例正常生育男性和87例不育患者进行精浆中L-肉毒碱水平分析.结果 在所建立的分析条件下,L-肉毒碱衍生化产物的色谱保留时间约为13 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确.L-肉毒碱在0～1 000 μmol/L浓度范围线性良好.样品测定批间(n=6)及平均批内(n=5)测定的相对标准偏差分别为1.36%和1.23%,回收率为91.6%～96.5%.对30名正常生育男性及87例不育患者精浆中L-肉毒碱含量测定结果显示:正常生育组(n=30)为(392.7±107.2) μmol/L;弱精不育组(n=29)为(270.0±83.9) μmol/L;少精不育组(n=19)为(187.9±43.9) μmol/L;弱、少精不育组(n=39)为(175.7±67.1) μmol/L.统计学分析表明正常生育组与各不育组之间的差异均有统计学意义(P＜0.01);各不育组组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 精浆L-肉毒碱水平与精液中精子活力、精子密度等参数以及生育状况密切相关.其含量测定可作为男性不育症检查时一项有用的生化指标,为临床诊治和进行相关男性生殖功能机制研究提供参考。