【摘 要】
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目的 探讨白脂素(ASP)对高浓度葡萄糖(HG)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的保护作用及机制.方法 建立HG诱导H9C2损伤模型.实验分为正常对照组(Ctrl,5.5 mmol?L-1)、高浓度葡萄糖组(HG,50 mmol?L-1)、Ctrl+ASP(20 nmol?L-1)组和HG+ASP(20 nmol?L-1)组.Ctrl组和Ctrl+ASP组细胞先用含正常浓度葡萄糖(5.5 mmol?L-1)的完全培养基处理36 h,HG组和HG+ASP组则先用含葡萄糖50 mmol?L-1的完全培养基处理3
【机 构】
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江西省基础药理学重点实验室;南昌大学药学院药理学教研室,南昌 330006;南昌大学药学院,南昌 330006
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目的 探讨白脂素(ASP)对高浓度葡萄糖(HG)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的保护作用及机制.方法 建立HG诱导H9C2损伤模型.实验分为正常对照组(Ctrl,5.5 mmol?L-1)、高浓度葡萄糖组(HG,50 mmol?L-1)、Ctrl+ASP(20 nmol?L-1)组和HG+ASP(20 nmol?L-1)组.Ctrl组和Ctrl+ASP组细胞先用含正常浓度葡萄糖(5.5 mmol?L-1)的完全培养基处理36 h,HG组和HG+ASP组则先用含葡萄糖50 mmol?L-1的完全培养基处理36 h,36 h后将各组培养基均换成正常葡萄糖浓度的完全培养基;除Ctrl组和HG组外,其余2组分别加入20 nmol?L-1的ASP继续培养24 h.处理结束后收集细胞和上清液,采用CCK8检测分析各组细胞活力,使用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等指标,Western blotting和RT-PCR检测各组细胞SOD、GSH-PX蛋白及mRNA表达量,荧光倒置显微镜检测ROS水平.结果 当用葡萄糖浓度为50 mmol?L-1的培养基处理细胞时,细胞活力下降,LDH活性升高,与Ctrl组比较,差异有统计学意义(P<0.05),表明损伤模型建立成功;与HG组相比,HG+ASP组的细胞活力升高,LDH活性和MDA含量下降,SOD和GSH-PX的表达和活性均显著升高,ROS水平显著下降(均P<0.05).结论 ASP对HG诱导的H9C2损伤具有保护作用,其机制主要通过对抗ROS介导的氧化应激来实现.
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