【摘 要】
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目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)作为新型重组干扰素mix基因的载体治疗结肠癌的可行性.方法 制备携带mix基因的腺病毒pDC359-mix+ F35；分离培养CIK细胞；腺病毒Ad5-EGFP、Ad11-EGFP和Ad35-EGFP以感染复数(MOI)=100时感染CIK细胞24、48 h后观察感染效率；腺病毒pDC359-mix+ F35以MOI=0、1、10、100、1000感染
【机 构】
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200438上海,第二军医大学东方肝胆外科医院基因病毒治疗实验室,200438上海,第二军医大学东方肝胆外科医院基因病毒治疗实验室,浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所,浙江理工大学生命科
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目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)作为新型重组干扰素mix基因的载体治疗结肠癌的可行性.方法 制备携带mix基因的腺病毒pDC359-mix+ F35；分离培养CIK细胞；腺病毒Ad5-EGFP、Ad11-EGFP和Ad35-EGFP以感染复数(MOI)=100时感染CIK细胞24、48 h后观察感染效率；腺病毒pDC359-mix+ F35以MOI=0、1、10、100、1000感染CIK细胞2、4、6、8d,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中干扰素mix表达量；磺酰罗丹明B(SRB)显色法检测浓度为0.001、0.01、0.1、1、10μg/L的干扰素mix和干扰素α-2b对结肠癌细胞株HT29和SW480的抑制作用；乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测效靶比为3∶1、10∶1的CIK和CIK-mix对HT29和SW480的杀伤作用.结果 腺病毒pDC359-mix+ F35成功制备,MOI=100,感染48 h后对CIK细胞的感染效率可达80％以上；当MOI=100时,各时间段干扰素mix的表达量均达到(8.96±2.10)ng以上；当浓度为10 μg/L,干扰素mix对结肠癌细胞株抑制率分别为72.8％和70.1％,而干扰素α-2b分别为30.4％和28.6％；腺病毒pDC359-mix+ F35感染CIK后,CIK-mix对HT29和SW480的杀伤作用均比CIK增强了20％以上.结论 表达干扰素mix的CIK细胞体外能够发挥联合的抗肿瘤效应。
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