【摘 要】
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目的:了解在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)刺激下,转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况.研究在大鼠肾系膜细胞中,Ox-LDL对TGF-β1基因启动子转录活性的
【机 构】
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复旦大学中山医院肾内科,上海,200032解放军广州军区武汉总医院肾内科;中国科学院上海生化与细胞研究所;
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目的:了解在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)刺激下,转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况.研究在大鼠肾系膜细胞中,Ox-LDL对TGF-β1基因启动子转录活性的影响作用. 方法:用聚合酶链反应(PCR)、酶切和亚克隆的方法,构建出5个TGF-β1启动子缺失体-虫荧光素酶(luciferase)报告基因,利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性. 结果:在Ox-LDL(100 mg/L)刺激下,luciferase的活性12 h即出现,并于36 h达到平台期.对Ox-LDL刺激的应答,TGF-β1启动子-1550到-845之间可能存在着增强子,-629到-422之间则可能有抑制子.计算机软件分析表明,前者内有一转录激活蛋白-1(AP-1)精确识别位点. 结论:在大鼠肾系膜细胞TGF-β1基因启动子中,AP-1结合序列(TGAGTCA)可能是应答Ox-LDL的顺式作用元件.Ox-LDL上调TGF-β1的表达至少部分是通过AP-1蛋白来介导的,且Ox-LDL可能通过蛋白激酶C(PKC)信号通路激活AP-1从而正调控TGF-β1基因的转录过程.
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