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目的建立一种快速、准确测定兔血清中头孢曲松浓度的高效液相色谱方法。方法在兔血清中加入含有内标甲硝唑的甲醇沉淀蛋白后取上清液,用微孔滤膜过滤后,直接进样测定。使用Agilent1100色谱系统。ThermoHpersilODS2色谱柱,流动相:CH3OH:H2O:29.8mmol·L-1K2HPO3:14.7mmol·L-1KH2PO3:87.7mmol·L-1C6H5Na3O7=214:440:27.5:27.5:5,其中含有3.1mmol·L-1的四丁基溴化铵,缓冲盐部分用0.95mol·L-1的C6H8O4调PH值=3.0±0.1;流速为1ml·min-1;柱温:28℃;检测波长254nm。结果头孢曲松在兔血清中浓度在31.5～1008mg·L-1范围内线性良好。最低检测浓度为4mg·L-1。血清中日内差≤0.90%,日间差≤1.41%。回收率95.85%～102.54%。结论本方法快速、准确,可为头孢曲松在体内血清药物浓度分析提供有意义的方法学参考。