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为提高牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)核酸疫苗的免疫效力,本实验应用PCR方法扩增BVD病毒(BVDVlE0基因.构建真核表达质粒pVAXl-E0,转染293T细胞,经RT.PCR和westernblot分析显示,转染细胞能够瞬时表达E0蛋白。并分别将pVAXl、pVAX1-E0或将pVAXl-E0分别与一种表达细胞因子基因的重组质粒作为佐剂(pVAXl-IL-2、pVAXl-IL-4及pVAXl-IFN-γ)免疫小鼠,采用间接ELISA法检测免疫小鼠BVDV抗体效价,以MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞