【摘 要】
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目的:通过体内、外研究观察解毒化瘀颗粒(JDHY)对Kupffer细胞(KC)中NF-κB信号通路的影响及拮抗肝功能衰竭的作用机制.方法:将45只大鼠随机分为对照组、模型组和JDHY组,各15
【机 构】
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湖南中医药大学,长沙410000;湖南中医药大学,长沙410000;广西中医药大学第一附属医院,南宁530023;广西中医药大学第一附属医院,南宁530023;广西中医药大学,南宁530023;广西中
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目的:通过体内、外研究观察解毒化瘀颗粒(JDHY)对Kupffer细胞(KC)中NF-κB信号通路的影响及拮抗肝功能衰竭的作用机制.方法:将45只大鼠随机分为对照组、模型组和JDHY组,各15只.采用D-氨基半乳糖联合脂多糖一次性腹腔注射构建急性肝功能衰竭(ALF)大鼠模型,JDHY组在造模前3天加用JDHY(8.8g/kg).造模完成后,观察各组大鼠24h存活率,检测各组大鼠ALT、AST、TBIL水平,RT-PCR检测TNF-α、IL-6、IL-1 β mRNA,Western blot检测CD14和NF-κB蛋白.另取10只大鼠予JDHY(8.8g/kg)连续灌胃5d,制备含药血清并腹主动脉采血.采用Pronase/Collagenase灌注法分离大鼠KC,并将分离后的KC分为对照组、LPS组及JDHY+LPS组.采用免疫荧光法检测p-NF-κBp65和p-IκB α,RT-PCR检测TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA水平.结果:JDHY可提高ALF大鼠存活率(P＜0.05),改善肝功能(血清ALT、AST、TBIL)(P＜0.05),降低促炎因子(TNF-α、IL-6、IL-1 β mRNA)和CD14、NF-κB蛋白水平(P＜0.05),改善肝脏病理学状态.与LPS组比较,JDHY可降低LPS诱导KC中p-IκB α、p-NF-κBp65及TNF-α、IL-6、IL-1 β mRNA水平(P＜0.05).结论:JDHY可通过调节ALF大鼠KC的NF-κB信号通路,减轻免疫损伤、降低促炎因子释放,从而拮抗ALF.
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