小鼠Dnmt1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性分析

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lxj5186101

【摘要】

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为研究小鼠Dnmt1 基因启动子5＇端缺失片段活性，以小鼠基因组DNA 为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增4 条不同长度的小鼠Dnmt1 基因启动子5＇端系列缺失片段，双酶切后克隆入pGL3-B

【作者】

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张远杨旬旬吴风瑞刘勇丁彪王彩红黄继昌

【机构】

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安徽农业大学生命科学学院,胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室,阜阳师范学院生命科学学院

【出处】

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生物技术通报

【发表日期】

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2013年10期

【关键词】

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小鼠 Dnmt1启动子 NIH/3T3细胞系活性分析

【基金项目】

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国家自然科学基金项目(31071310,31201789);安徽省教育厅高等学校自然科学研究重点项目(KJ2013A202)

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为研究小鼠Dnmt1 基因启动子5＇端缺失片段活性，以小鼠基因组DNA 为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增4 条不同长度的小鼠Dnmt1 基因启动子5＇端系列缺失片段，双酶切后克隆入pGL3-Basic 荧光素酶报告基因载体，构建Dnmt1 启动子-pGL3-Basic 重组质粒。随后经脂质体转染入NIH/3T3 细胞并检测各缺失片段荧光素酶活性。结果表明，成功构建Dnmt1 启动子5＇端系列缺失片段-pGL3-Basic 荧光报告基因重组质粒。经双荧光素酶报告基因检测后发现，所有的重组质粒

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