目的:对猴头菌丝固体培养物中尿苷、鸟苷、腺苷3个核苷类成分进行含量测定,同时建立HPLC指纹图谱。方法:采用SunFire^TM C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004A）进行指纹图谱分析。结果:10批猴头菌丝固体培养物样品中尿苷、鸟苷、腺苷3个核苷类成分线性范围分别为2.4³8.9、1.9²9.6、1.7²6.9μg·m L^-1,平均加样回收率分别为97.8%、98.4%、99.0%,含量分别在127.17⁴81.88,68.36²82.36,91.10²80.47μg·g^-1范围内。建立了10个批次猴头菌丝固体培养物的共有图谱,提取了21个色谱峰作为指纹图谱共有峰,指纹图谱相似度在0.93以上。结论:建立的猴头菌丝固体培养物含量测定及指纹图谱方法简便可靠,重复性好,可为猴头菌丝固体培养物质量控制和评价提供依据。