胰岛素分泌囊泡双层脂膜中胆固醇的可视化与定量研究

来源 :西安交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anlyok
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目的 通过菲律宾菌素Ⅲ染色和脂质测定法,对胰岛素分泌囊泡双层脂膜中胆固醇的分布进行可视化与定量研究.方法 利用胆固醇荧光探针菲律宾菌素Ⅲ标记稳定表达phogrin-gfp的min6细胞,对比细胞内游离胆固醇与胰岛素分泌囊泡的分布情况.通过连续蔗糖密度梯度离心法分离min6细胞中的胰岛素分泌囊泡,应用钼酸铵分光光度法和薄层分析法分别测定生物脂膜中磷脂和游离胆固醇含量,从而得到胆固醇所占比例.结果 min6细胞内菲律宾菌素Ⅲ标记的游离胆固醇与胰岛素分泌囊泡在胞浆中的分布一致,主要聚集在核周及细胞膜下.此外,连
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