【摘 要】
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目的 探讨沉默磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypican,GPC)1表达对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及周期的影响.方法 从针对GPC1基因的4组含不同shRNA序列的干扰载体中筛选沉默效率最高的一组,将转染该组干扰载体的A549细胞作为GPC1沉默组(shGPC1),另设空白对照组(NC,未转染)及阴性对照组(shNC,转染无意义shRNA序列质粒),采用Real time PCR和Western blot法分别检测转染后各组A549细胞中GPC1 mRNA及蛋白的表达水平,CCK8法检测细胞的增殖情况,流式
【机 构】
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江苏省苏北人民医院功能检查科,江苏扬州225000;吉林省肿瘤医院放疗一科,吉林长春130000;吉林大学第二医院肿瘤放疗科,吉林长春130000
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目的 探讨沉默磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypican,GPC)1表达对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及周期的影响.方法 从针对GPC1基因的4组含不同shRNA序列的干扰载体中筛选沉默效率最高的一组,将转染该组干扰载体的A549细胞作为GPC1沉默组(shGPC1),另设空白对照组(NC,未转染)及阴性对照组(shNC,转染无意义shRNA序列质粒),采用Real time PCR和Western blot法分别检测转染后各组A549细胞中GPC1 mRNA及蛋白的表达水平,CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化.结果 shGPC1组A549细胞中GPC1 mRNA及蛋白的表达水平比NC组和shNC组均明显降低(P＜ 0.001).与NC组及shNC组比较,shGPC1组A549细胞的生长明显受到抑制(P＜0.001),细胞抑制率分别可达40.32％和39.82％;细胞凋亡率分别增加9.9％和9.06％(P＜0.001);细胞G2/M期比例分别增加16.01％和15.07％ (P＜0.001).结论 沉默A549细胞中GPC1的表达可抑制细胞增殖,加速细胞凋亡,引起细胞发生G2/M期阻滞.本研究为以GPC1作为参考靶点开发非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)新的靶向药物提供了参考,也为开发放疗联合靶向GPC1治疗NSCLC的新型治疗方案提供了思路.
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