【摘 要】
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采用PCR从海栖热袍菌(Thermotoga maritima)克隆出编码极耐热稳定性阿拉伯糖苷酶基因,以pET-20b为表达质粒,与其C末端6个组氨酸标签序列融合,在大肠杆菌中得到高效表达.基因
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室
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采用PCR从海栖热袍菌(Thermotoga maritima)克隆出编码极耐热稳定性阿拉伯糖苷酶基因,以pET-20b为表达质粒,与其C末端6个组氨酸标签序列融合,在大肠杆菌中得到高效表达.基因表达产物通过热处理和亲和层析柱纯化后,酶纯度达电泳均一.纯化重组酶稳定性检测表明,阿拉伯糖苷酶活性最适作用温度和最适作用pH分别为90～95℃和pH 5.0～5.5,在pH 4.2～8.2之间酶活力稳定,95℃的半衰期为4h;SDS-PAGE测得酶的分子量为56.57 kD,与理论推算值相吻合.在所测定的底物中,
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