【摘 要】
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目的 观察三维培养条件下不同转移潜能人肝癌细胞株MHCC97-H/L形成血管生成拟态的差异,并探讨其血管生成相关机制.方法 建立MHCC97-H、MHCC97-L三维培养体系,倒置显微镜下观察24h血管样结构形成差异.应用血管生成基因芯片筛选三维培养24 h后两种细胞差异表达的基因,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法验证部分差异基因的表达.结果 三
【机 构】
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300070,天津医科大学研究生院，安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科,安徽省立医院肝脏外科
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目的 观察三维培养条件下不同转移潜能人肝癌细胞株MHCC97-H/L形成血管生成拟态的差异,并探讨其血管生成相关机制.方法 建立MHCC97-H、MHCC97-L三维培养体系,倒置显微镜下观察24h血管样结构形成差异.应用血管生成基因芯片筛选三维培养24 h后两种细胞差异表达的基因,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法验证部分差异基因的表达.结果 三维培养24 h,MHCC97-H和MHCC97-形成的血管样结构长度分别为(474.00±16.37)、(319.67±40.50)mm/cm2,MHCC97-H形成的血管样结构长度明显较MHCC97-L长(P＜0.01).在113个血管生成相关基因中,MHCC97-H表达较MHCC97-L上调2倍以上的有4个,包括Angiopoietin-like 4、Jagged 1、Endoglin和VE-cadherin.RT-PCR和Western blot方法验证结果与基因芯片结果一致.结论 高转移潜能人肝癌细胞株MHCC97-H体外形成血管生成拟态能力明显较低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97-L强,其原因可能与MHCC97-H高表达某些血管生成基因有关。
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