棉铃虫核多角体病毒p10基因的序列及转录分析

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为了利用棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)p10基因的启动子构建重组病毒杀虫剂及表达系统,应用末端测序法和引物步移法测定了p10基因的序列,并应用Northern杂交和引物延伸实验对该基因进行了深入的转录特性分析。HaSNPV p10基因被定位于基因组DNA的115.4kb~115.6kb处,转录方向与多角体基因相反,在其上下游分别发现了p26和p74基因。转录分析结果确定了p10基因是个极晚期基因,其转录从杆状病毒晚期转录保守序列GTAAG的第二个A开始,转录产物大小约为430nt。HaSNPV p10基因最早可检测到的转录是在病毒感染后的20h,随后其转录产物量迅速放大,到感染后72h达到非常高的水平。转录时相分析同时还检测到一个大小为1 300nt的产物,推测该产物为p26和p10通读的转录产物。对HaSNPV P10蛋白序列的分析表明,该蛋白第6~44位及第51~65位氨基酸序列处含多个典型的卷曲螺旋七聚体重复结构,两片段间相隔6个氨基酸残基,在该蛋白序列的第20~34位与第51~65位存在L-X(2)-L-X(10)-L的亮氨酸重复。Helicalnet分析表明,HaSNPV P10的疏水氨式酸分布为两个集簇区,两者互为180度转角。
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