【摘 要】
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为了改进奶牛乳腺上皮细胞原代培养技术和探究乳腺组织冻存方法,选用24月龄无泌乳史荷斯坦奶牛,采用组织块种植法,通过侧置和倒置两种方式,分别从新鲜和冻存（8个月）的乳腺组织
【机 构】
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中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
【基金项目】
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国家奶牛产业技术体系(CARS37);公益性行业专项(20130304)
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为了改进奶牛乳腺上皮细胞原代培养技术和探究乳腺组织冻存方法,选用24月龄无泌乳史荷斯坦奶牛,采用组织块种植法,通过侧置和倒置两种方式,分别从新鲜和冻存（8个月）的乳腺组织中分离培养奶牛乳腺上皮细胞。结果表明,侧置处理能使乳腺细胞爬出时间缩短1-2d,并改善组织块贴壁速度和效果;回收于前次培养后的乳腺组织块再分离培养,贴壁第2天即有乳腺上皮细胞爬出;一步冷冻（-80℃）液氮保存较大奶牛乳腺组织块,冻存液A（FBS∶DMSO∶DMEM/F12=7∶2∶1）冻存的组织块存活率为50%,冻存液B（FBS∶DMEM
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