衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1在D型沙眼衣原体外膜中结合位点的检测

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目的 发现噬菌体phiCPG1衣壳蛋白 Vp1在沙眼衣原体中的结合位点,为理解噬菌体与衣原体的相互作用提供线索.方法 诱导表达噬菌体phiCPG1的衣壳蛋白Vp1,通过胶回收进行目的蛋白的纯化,复性后以Far-Western印迹技术检测Vp1是否能与衣原体外膜中重组多形外膜蛋白(rPmp)家族及主要外膜蛋白(MOMP)结合.结果 在大肠埃希菌中成功表达蛋白Vp1;抗Vp1的单克隆抗体作为一抗进行Western印迹,结果无特异性条带出现,可见针对Vp1的单克隆抗体不与任何一种rPmp结合.Far-Western印迹结果显示,在rPmpI的位置出现明显的条带,在相对于其他rPmp和MOMP的位置无特异性条带的出现,证实Vp1能特异结合D型沙眼衣原体标准株的外膜蛋白rPmpI.结论 沙眼农原体外膜中有Vp1的结合位点,可能通过和rPmpI的结合从而特异性地与沙眼农原体结合.
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