【摘 要】
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PEG能够提高连接酶连接效率,但是对转化率的影响被忽视,特别是基因工程操作进入到精细定量阶段。以BL21（DE3）为宿主细胞,探讨32%PEG200、75℃30min处理对pET20b质粒转化率的影
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,农业部农业酶工程重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31371831）
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PEG能够提高连接酶连接效率,但是对转化率的影响被忽视,特别是基因工程操作进入到精细定量阶段。以BL21（DE3）为宿主细胞,探讨32%PEG200、75℃30min处理对pET20b质粒转化率的影响。以不经任何处理的1 ng pET20b转化率100%作为对照,高温处理后转化率为82.3%,PEG处理后转化率为8%,PEG且高温处理后转化率为0%,利用PCR产物回收试剂盒去除PEG可恢复15.3%转化率,说明75℃高温处理对转化率影响很小,PEG则严重影响转化率,PEG且75℃高温处理导致转化失败。通过
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