HRM技术在梅花鹿茸及其混伪品药材鉴定中的应用

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目的采用高分辨率熔解曲线技术(HRM),基于SRY序列对梅花鹿茸及相关混伪品药材进行快速鉴别,为规范市场药材管理提供一个新的分子检测手段。方法购买梅花鹿茸及相关鹿茸药材进行DNA提取,选择SRY序列为鉴别序列,在退火温度为57℃,40个循环数的条件下,建立正品梅花鹿茸的熔解曲线模型,并对其DNA模板浓度、引物浓度进行筛选得到适宜范围。结果在DNA质量浓度为10~100 ng·μL-1、引物浓度为10μmol·L-1的条件下,正品梅花鹿茸药材的熔解曲线Tm值为(82.77±0. 03)℃。应用该方法检测市场随机收集的10份鹿茸产品,通过比较分析7份为正品梅花鹿茸,3份为驯鹿茸。进而将其PCR产物进行测序,加以验证。结论 HRM方法稳定、灵敏、重现性好,可以实现简单、快速、高通量、可视化的鹿茸药材鉴定。
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