【摘 要】
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【目的】研究基于穿膜肽和抗菌肽构效关系改造获得的新肽P7的抗菌活性及其对大肠杆菌(E.coli)的抑菌机制。【方法】微量稀释法和溶血实验分析P7的抑菌活性及其对正常细胞的细
【机 构】
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江南大学食品学院食品营养与功能因子研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31172214);国家“863计划”(2007AA10Z325);江苏高校优势学科建设工程资助项目~~
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【目的】研究基于穿膜肽和抗菌肽构效关系改造获得的新肽P7的抗菌活性及其对大肠杆菌(E.coli)的抑菌机制。【方法】微量稀释法和溶血实验分析P7的抑菌活性及其对正常细胞的细胞毒性;采用膜荧光探针、流式细胞术和扫描电镜分析P7对E.coli膜通透性、膜完整性的影响和细胞超微结构变化;通过激光共聚焦分析P7在E.coli细胞中的定位;凝胶阻滞实验测定P7与E.coli基因组DNA结合能力。【结果】P7比母肽显示更强的抑菌活性,最低抑菌浓度范围为4-32μmol/L,且在作用浓度范围内具有较弱的溶血活性。P7可以增加E.coli外膜和内膜的通透性,使E.coli细胞膜的完整性和细胞表面结构受损。同时P7可以穿过E.coli细胞膜在细胞质聚集并与基因组DNA结合。【结论】P7通过增加E.coli内外膜通透性,穿过细胞膜与胞内DNA结合发挥抑菌活性。
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