【摘 要】
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目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）BDNF-AS在肾癌组织中的表达，及其对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响和分子机制。方法采用实时反转录聚合酶链反应（rRT-PCR）检测2017年5月至2018年7月鄂东医疗集团黄石市中心医院67例肾癌患者癌组织、癌旁组织及正常肾小管上皮细胞株HK-2和肾癌细胞株A498、ACHN、OS-RC-2、Caki-1、786-O中BDNF-AS基因表达水平。以BDNF
【机 构】
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目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）BDNF-AS在肾癌组织中的表达，及其对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响和分子机制。
方法采用实时反转录聚合酶链反应（rRT-PCR）检测2017年5月至2018年7月鄂东医疗集团黄石市中心医院67例肾癌患者癌组织、癌旁组织及正常肾小管上皮细胞株HK-2和肾癌细胞株A498、ACHN、OS-RC-2、Caki-1、786-O中BDNF-AS基因表达水平。以BDNF-AS表达水平最低的肾癌细胞株Caki-1为研究对象，瞬时转染BDNF-AS过表达质粒（实验组）或载有无意义序列的质粒（对照组）。采用rRT-PCR检测转染效率。转染Caki-1细胞24 h后，通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞增殖情况，采用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力，rRT-PCR检测G型酪氨酸磷酸酶受体（PTPRG）mRNA水平，采用蛋白质印迹法检测PTPRG及PI3K-AKT通路相关蛋白的表达水平。
结果肾癌组织中BDNF-AS相对表达量低于癌旁组织（0.96±0.24比4.62±0.84，t=41.76，P<0.01）。各肾癌细胞株中BDNF-AS相对表达量均低于正常肾小管上皮细胞株HK-2（均P<0.05），其中Caki-1细胞中的相对表达量最低（0.10±0.01）。实验组Caki-1细胞BDNF-AS相对表达量高于对照组（P<0.01）。转染第2天起，实验组Caki-1细胞增殖能力低于对照组（均P<0.05）。转染24 h后的Caki-1细胞迁移15 h后，实验组迁移Caki-1细胞数低于对照组[（51±8）个比（192±25）个，t=5.31，P<0.01]。转染48 h后，实验组Caki-1细胞中PTPRG mRNA相对表达量（P<0.01）及蛋白表达水平均高于对照组，实验组Caki-1细胞中PI3K-AKT信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、p-Tpl2的表达水平均低于对照组。
结论BDNF-AS在肾癌组织和细胞株中表达均下调，过表达BDNF-AS可抑制肾癌Caki-1细胞的增殖和迁移能力，其分子机制可能与BDNF-AS促进PTPRG基因表达、干扰PI3K-AKT信号通路的转导有关。
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