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利用RT-PCR技术，提取黑曲霉（Aspergillus niger）L3的总RNA进行反转录，并通过PCR扩增得到去除天然信号肽的β-1，4-葡聚糖酶基因eg Ⅰ，将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上，使之位于α-因子信号肽下游，并与之同框，构建重组表达质粒pPIC9k-egⅠ，电击转化毕赤酵母GS115，经MM、MD、CMC-Na和G418平板筛选，得到重组毕赤酵母工程菌1#和5#，在摇瓶中β1，4-葡聚糖酶酶活分别达到1456U／mL和1928U／mL。重组酶最适温度为70℃，最适pH为5．0。