论文部分内容阅读
目的：建立重组hPK-5质粒DNA基因治疗制剂的质量标准和检测方法。方法：采用限制性酶切图谱分析鉴定质粒DNA结构和PCR法鉴定插入的hPK-5基因作鉴别试验；采用分光光度法测定质粒DNA含量和A260/A280比值；采用琼脂糖凝胶电泳法分析质粒DNA的超螺旋构象比例和残留RNA含量；采用阴离子交换色谱法分析HPLC纯度；采用ELISA法测定hPK-5蛋白的表达量；采用内皮细胞迁移法测定hPK-5蛋白的生物学活性。结果：重组质粒DNA的限制性酶切片段大小与理论值一致；插入基因PCR扩增片段大小与理论值相符