【摘 要】
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目的:探讨不同浓度的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021对体外培养的大鼠软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响。方法:新生24hSD大鼠8只(雌雄不限),取出关节软骨进行软骨细
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心; 上海市中医药研究院骨伤科研究所; 上海中医药大学;
【基金项目】
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“中医骨伤科学”国家重点学科项目(100508);上海市中医药领军人才建设项目(2012-63-15);上海领军人才项目(041)“海派中医流派传承研究基地”项目(ZYSNXDCC-HPGC-JD-001);国家自然科学基金项目(81173277,81072830);上海市科委重点科技攻关项目(11DZ197290211DZ1973402);上海市中医药事业发展三年行动计划项目(ZYSNXD-
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目的:探讨不同浓度的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021对体外培养的大鼠软骨细胞增殖和Ⅱ型胶原表达的影响。方法:新生24hSD大鼠8只(雌雄不限),取出关节软骨进行软骨细胞培养,细胞培养48h后进行软骨细胞免疫荧光鉴定。以不同药物浓度将软骨细胞分为四组,分别加入浓度为0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021进行干预。24h后分别观察不同浓度组细胞形态的变化,蛋白印迹分析法(Western blot)检测Ⅱ型胶原、β-catenin和PCNA蛋白的表达情况。结果:在0.00μmol/L(对照组),0.75μmol/L,1.50μmol/L,3.00μmol/L的Wnt/β-catenin信号通路激活剂Chir99021干预下,各组细胞数量明显逐渐增加,与对照组相比较,各加药组β-catenin和PCNA蛋白的表达逐渐上调(P<0.05),而Ⅱ型胶原蛋白的表达逐渐下降(P<0.05)。结论:不同浓度的Chir99021激活Wnt/β-catenin信号通路后明显促进了软骨细胞的增殖,却抑制了软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原。
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