西部马脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法建立及标准质控品制备

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：w734289467

【摘要】

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选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析，选择保守区域，设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化，建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法，应用建立

【作者】

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谷强吴亚琼高志强刘环张伟蒲静乔彩霞张鹤晓吴清

【机构】

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中国农业大学动物医学院,北京出入境检验检疫局

【出处】

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中国动物检疫

【发表日期】

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2013年11期

【关键词】

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西部马脑炎病毒实时荧光RT-PCR 标准质控品 Western equine encephalomyelitis virus Real-time RT-PC

【基金项目】

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质检公益性行业科研专项“马重大外来虫媒病抗体、核酸快速检测技术研究”（201010033）

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选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析，选择保守区域，设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化，建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法，应用建立的方法对西部马脑炎病毒核酸、东部马脑炎病毒核酸、马动脉炎病毒核酸、马疱疹病毒1型核酸、马流感病毒H3N8亚型核酸进行检测，结果表明建立的方法只能检出西部马脑炎病毒核酸，与另外4种病毒核酸无交叉反应。进一步通过体外转录制备了西部马脑炎病毒McMillan株7442-10011的cRNA片段，经拷贝数计算、稀释、分装、均匀性和稳定性

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