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选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析,选择保守区域,设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化,建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法,应用建立的方法对西部马脑炎病毒核酸、东部马脑炎病毒核酸、马动脉炎病毒核酸、马疱疹病毒1型核酸、马流感病毒H3N8亚型核酸进行检测,结果表明建立的方法只能检出西部马脑炎病毒核酸,与另外4种病毒核酸无交叉反应。进一步通过体外转录制备了西部马脑炎病毒McMillan株7442-10011的cRNA片段,经拷贝数计算、稀释、分装、均匀性和稳定性