【摘 要】
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目的构建小鼠Stra8的诱饵表达载体,为应用酵母双杂交系统筛选与Stra8相互作用的蛋白建立实验基础。方法应用PCR扩增Stra8编码序列的不同长度片段,将其先克隆入pGBKT7载体内,
【机 构】
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扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室
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目的构建小鼠Stra8的诱饵表达载体,为应用酵母双杂交系统筛选与Stra8相互作用的蛋白建立实验基础。方法应用PCR扩增Stra8编码序列的不同长度片段,将其先克隆入pGBKT7载体内,经序列测定确认无误后,将构建好的系列诱饵载体pGBKT7-Stra8转化到酵母细胞AH109及Y187中,进行诱饵载体的毒性及自激活活性分析。结果构建了Stra8的诱饵载体共8种,经过自激活活性的分析发现,其中7种诱饵载体均具有自激活活性,仅有一种诱饵载体没有自激活活性,可用于后续的酵母双杂交筛选实验。结论成功构建了Stra8的酵母双杂交诱饵表达载体,为进一步筛选与之相互作用的蛋白提供实验基础。
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