【摘 要】
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目的:探讨蒺藜总皂苷对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、NO的影响和机制.方法:以巨噬细胞RAW264.7作为实验对象,分成Control(空白对照)组、LPS(LP
【机 构】
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成都中医药大学,成都 611130
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目的:探讨蒺藜总皂苷对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、NO的影响和机制.方法:以巨噬细胞RAW264.7作为实验对象,分成Control(空白对照)组、LPS(LPS处理)组和GSTT-L(蒺藜总皂苷低剂量)、GSTT-M(蒺藜总皂苷中剂量)、GSTT-H(蒺藜总皂苷高剂量)组(分别以10、20、40μg/ml的蒺藜总皂苷和LPS处理).CCK-8法检测细胞增殖变化,ELISA法检测培养液上清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2水平,Griess法检测培养液上清中NO含量,Western blot检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Toll样受体4(TLR4)蛋白表达.在巨噬细胞RAW264.7中转染pcDNA3.1-TLR4,然后给予蒺藜总皂苷和LPS处理,同样利用上述方法测定细胞增殖、培养液上清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2水平、NO含量以及iNOS、TLR4蛋白表达水平.结果:与Control组比较,LPS组巨噬细胞增殖活性下降,细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2和NO增多,细胞中iN-OS、TLR4蛋白表达水平升高.与LPS组比较,GSTT-L、GSTT-M、GSTT-H组巨噬细胞增殖活性依次升高,细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2和NO依次减少,细胞中iNOS、TLR4蛋白表达水平依次降低.pcDNA3.1-TLR4可以逆转蒺藜总皂苷对LPS诱导的巨噬细胞增殖、分泌IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、NO以及细胞中iNOS、TLR4蛋白表达作用.结论:蒺藜总皂苷抑制LPS诱导的巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、NO,与下调TLR4表达有关.
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