【摘 要】
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目的构建并鉴定携带人p58.2基因的重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系.方法用PCR技术从pSPORT1-p58.2扩增出编码p58.2N端1～345个氨基酸的全长基因,定向克隆入逆转录病毒载
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目的构建并鉴定携带人p58.2基因的重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系.方法用PCR技术从pSPORT1-p58.2扩增出编码p58.2N端1～345个氨基酸的全长基因,定向克隆入逆转录病毒载体pMSCVneo中,酶切鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果双酶切鉴定,成功构建重组逆转录病毒载体;重组逆录病毒载体转入包装细胞,经G418筛选,形成了抗性克隆,并测得病毒滴度为3×105 cfu/ml,提示构建携带人p58.2基因的逆转录病毒载
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