卫辉位于河南北部，近几年无蚊传疟疾病例，大部分医院未开展疟疾检查。今年按照全球基金河南疟疾项目办要求，各级各类医疗机构应建立门诊镜检站(发热门诊)，全年对就诊的“三热”患者(临床初诊疟疾、疑似疟疾和原因不明发热)进行血检，所有外来流动人口和从高疟区回归的当地居民中的发热患者均应进行血检。发热患者血涂片显微镜检查，是疟疾诊断和虫种鉴别的主要方法，是疟疾疾病控制和检测的重要手段。其基本过程是采血-涂制血膜-染色前处理-染色-镜检。常用的血膜涂片有两种，一种是借推片将血液薄薄地涂在载玻片上，使每个血细胞平铺，称薄血膜，因薄血膜血液干燥快，原虫形态极少变形，多用于观察疟原虫形态与鉴别虫种；另一种是把较多的血液涂成圆形，血膜中血细胞重叠，原虫较为集中，称为厚血膜，厚血膜涂布面积小，阳性率检出较高。现采用的是一张载玻片上同时做厚、薄血膜各一个，检查是查厚血膜，薄血膜供编号和鉴别虫种用。血片制作的好坏直接影响到疟疾的诊断，在实际工作中遇到一些问题：①厚血膜制作困难，在染色前处理环节溶血漂洗过程中常出现血膜与载玻片完全或部分剥脱；②厚血膜有时有发黑现象；③薄血膜有时也有剥脱现象。从而导致制片失败，为此对厚、薄血片制片法进行改良。
　　资料与方法
　　材料：载玻片、蒸馏水，染色架，染色缸、甲醇、滴管、吉姆萨染液。
　　方法：①制片：取玻片两张，1张做载片，1张做推片(具有光华边缘)，在载片的中央偏右滴加1滴生理盐水，用右手大拇指和示指夹持推片侧缘中部，用推片的左下角刮取血液4～5μl(约火柴头大小)再用该端中部刮取血液1～1.5μl(约小米粒大小)。将左下角的血滴涂于载片已滴加的生理盐水上，有里向外画圈涂成直径0.8～1cm的圆形厚血膜。用干棉球抹净左角上的血迹，然后将推片下缘平抵载玻片的中部，推制薄血膜，并在薄血膜上编号。平放待干。②固定薄血膜：待血膜自然干燥后，在载片右侧下放另一载玻片，使载片厚血膜侧高于薄血膜侧，然后在薄血膜中部滴加1～2滴甲醇覆盖整个薄血膜，注意甲醇不可过量，过量有可能浸润厚血膜。③厚血膜溶血：等滴加在薄血膜上的甲醇充分干燥后，将载片以厚血膜侧朝下方向置于染色架上，将染色架浸入放有蒸馏水的染色缸内(蒸馏水深度以刚浸过厚血膜为宜)，约1分钟后将染色架从染色缸中轻轻取出，此时可发现溶血后的厚血膜呈灰白色。④染色镜检：不必待干用吉姆萨染液同时染色厚、薄血膜，流水冲洗，待干镜检。
　　结 果
　　采用改良厚、薄血膜法制作的血片，染色后薄血膜呈灰色，整个薄血膜形态完整；厚血膜未再见有发黑现象，流水冲洗后，厚血膜与载玻片结合牢固未再发生血膜与载玻片剥脱现象，镜检时背景清晰，仅见白血球和疟原虫。
　　讨 论
　　传统的厚、薄血膜血片制片法因厚血膜涂制时不容易涂制的厚薄均匀，流水冲洗时流水的冲力又容易使厚血膜与载玻片剥脱；固定薄血膜时有时会有甲醇浸到厚血膜上，导致厚血膜发黑；薄血膜脱落是因为甲醇固定后未完全干燥就进行厚血膜溶血处理，蒸馏水流到未固定好的薄血膜上引起的。从而导致制片失败。而改良的制片方法，厚血膜由于用生理盐水进行一定的稀释，从而使厚血膜薄厚均匀，同时厚血膜溶血方法是把载玻片放在染色架上将厚血膜完全浸入到蒸馏水中，即增加了蒸馏水对厚血膜的完全覆盖，取出时又减少了流水的冲力，从而使厚血膜与载玻片结合牢固、形态完整，厚血膜溶血完全，镜检时背景清晰，白血球和疟原虫分布均匀。改良制片法薄血膜固定时厚血膜侧高于薄血膜侧，避免了甲醇浸入到厚血膜上，减少了厚血膜染色后发黑的现象。
　　综上所述，改良后的制片方法与传统方法相比，减少了厚血膜剥脱，发黑，薄血膜部分剥脱现象，提高了制片的成功率，保证了疟疾诊断和虫种鉴别。