【摘 要】
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为鉴定禽白血病病毒(ALV) p27蛋白中的线性抗原表位,本研究以原核表达的重组p27蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA方
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽免疫抑制病科技创新团队,黑龙江哈尔滨,150001哈尔滨动物用生物制品国家工程研究中心有限公司,黑龙江哈尔滨,150001;
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为鉴定禽白血病病毒(ALV) p27蛋白中的线性抗原表位,本研究以原核表达的重组p27蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA方法筛选纯化获得一株能够稳定分泌特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株.Western blot试验结果显示,该MAb可以识别ALV的群特异性抗原p27蛋白.间接免疫荧光试验结果显示,MAb与A、B和J亚群ALV均呈阳性反应.对p27蛋白进行截短表达,利用western blot和间接ELISA进行表位鉴定,确定了MAb所识别的抗原表位位于129LVAITA SALQAFRE142.氨基酸序列比对结果显示,本研究所鉴定出的p27表位在A、B和J亚群ALV之间高度保守.本研究为ALV检测方法的建立及其免疫学功能的研究提供了有利的工具.
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