目的 探讨特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)短发夹核糖核酸(shRNA)对人胶质瘤U251细胞侵袭的影响及其机制.方法 构建针对SATB1的shRNA重组质粒,采用电穿孔的方法转染U251细胞中,分为对照组、空载体转染组、重组质粒转染组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞SATB1 mRNA水平的变化,采用Western blot检测各组细胞SATB1蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析;采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测细胞外基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9浓度的变化;采用划痕实验和Transwell实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化.结果 转染后48 h,SATB1-shRNA重组质粒转染组细胞外MMP-2的浓度为(69.4±3.5) μg/L,较对照组的(152.5±2.6)μg/L和空载体转染组的(150.5±5.2)μg/L明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).转染后48 h,ELISA法检测SATB1-shRNA重组质粒转染组细胞外MMP-9的浓度为(40.6±2.4) μg/L,较对照组的(86.7±6.7)μg/L和空载体转染组的(89.8±10.5)μg/L明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组、空载体转染组比较,重组质粒转染组U251细胞SATB1、MMP-2和MMP-9的表达下降,而基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)和SLC22A18表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05).划痕实验和Transwell实验显示重组质粒转染组细胞侵袭能力明显减弱.结论 针对SATB1的RNA干扰可以明显抑制U251胶质瘤细胞SATB1的表达,对U251胶质瘤细胞的侵袭能力产生明显抑制作用。
沉默特异性核基质结合区结合蛋白-1对胶质瘤U251细胞侵袭的影响
【摘 要】
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目的 探讨特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)短发夹核糖核酸(shRNA)对人胶质瘤U251细胞侵袭的影响及其机制.方法 构建针对SATB1的shRNA重组质粒,采用电穿孔的方法转染U251细胞中,分为对照组、空载体转染组、重组质粒转染组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞SATB1 mRNA水平的变化,采用Western blot检测各组细胞SATB1蛋白水平的变化,并
【机 构】
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201900上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科,201900上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科,201900上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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