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目的:通过制备大鼠心肌缺血再灌注模型,并在此基础上研究通冠胶囊不同剂量后适应以及缺血后适应方法对大鼠心肌梗死程度、心肌细胞凋亡状况的影响及作用机制。
方法:采用结扎心脏左前降支的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型,并随机分为6组(n=12),假手术组(shamoperation,SO)、心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型组、心肌缺血后适应组(ischemia postconditioning,IPC),以及通冠胶囊0.25g/kg(low dose,LD)、0.5g/kg(moderate dose,MD)、1g/kg(high dose,HD)三个组。实验结束后每组半数行NBT染色法及称重法测定心肌梗死范围;半数进行免疫组化法测定BCL-2蛋白及BAX蛋白表达;并行TUNEL染色测定凋亡指数;心尖部心肌组织测MDA及SOD水平。
结果:1.与SO组相比较,各组的梗死范围均明显增加(P<0.01),表明 心肌缺血再灌注模型成功。其中,与I/R相比较,IPC组与通冠胶囊HD组均可明显降低心肌梗死范围(p<0.01),且二者之间比较无明显差异(p>0.05);2.SO组仅个别细胞凋亡;I/R组凋亡的心肌细胞明显增加,通冠胶囊LD组凋亡的心肌细胞数量也较多,呈弥漫分布;IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡的心肌细胞数减少,IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞呈散在分布;与IR组相比,IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞数减少,差异性显著(P<0.05),IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞数减少三组之间比较无显著性差异(P>0.05),IPOl组与IP02组相比差异性显著(P<0.05)。3.与SO组相比较,其余各组反应心肌氧化损伤的心肌组织脂质过氧化产物MDA含量增加,SOD活性降低,差异均有显著性意义(P<0.01);与IR组相比,IPC组、MD组、HD组心肌MDA含量下降、SOD活性升高,差异性显著(P<0.05),IPC组、MD组与HD组三组之间比较无显著性差异(P>0.05);4.与SO组相比较,其余各组BCL-2及BAX蛋白表达均明显上升,具有显著性差异(P<0.01)。IPC组、MD组及HD组BCL-2蛋白表达均高于IR组(P<0.01);IPC组BAX蛋白表达低于IR组(P<0.01);LD组、MD组、HD组与IR组之间BAX蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。
结论:通冠胶囊后适应的心肌保护作用可通过降低局部氧自由基生成,升高BCL-2 蛋白表达,提高BCL-2/BAX比值,抑制心肌细胞凋亡实现。通冠胶囊后适应可部分起到模拟 缺血后适应的作用,且作用程度与剂量具有相关性。
方法:采用结扎心脏左前降支的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型,并随机分为6组(n=12),假手术组(shamoperation,SO)、心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型组、心肌缺血后适应组(ischemia postconditioning,IPC),以及通冠胶囊0.25g/kg(low dose,LD)、0.5g/kg(moderate dose,MD)、1g/kg(high dose,HD)三个组。实验结束后每组半数行NBT染色法及称重法测定心肌梗死范围;半数进行免疫组化法测定BCL-2蛋白及BAX蛋白表达;并行TUNEL染色测定凋亡指数;心尖部心肌组织测MDA及SOD水平。
结果:1.与SO组相比较,各组的梗死范围均明显增加(P<0.01),表明 心肌缺血再灌注模型成功。其中,与I/R相比较,IPC组与通冠胶囊HD组均可明显降低心肌梗死范围(p<0.01),且二者之间比较无明显差异(p>0.05);2.SO组仅个别细胞凋亡;I/R组凋亡的心肌细胞明显增加,通冠胶囊LD组凋亡的心肌细胞数量也较多,呈弥漫分布;IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡的心肌细胞数减少,IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞呈散在分布;与IR组相比,IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞数减少,差异性显著(P<0.05),IPC组、通冠胶囊MD组、HD组凋亡细胞数减少三组之间比较无显著性差异(P>0.05),IPOl组与IP02组相比差异性显著(P<0.05)。3.与SO组相比较,其余各组反应心肌氧化损伤的心肌组织脂质过氧化产物MDA含量增加,SOD活性降低,差异均有显著性意义(P<0.01);与IR组相比,IPC组、MD组、HD组心肌MDA含量下降、SOD活性升高,差异性显著(P<0.05),IPC组、MD组与HD组三组之间比较无显著性差异(P>0.05);4.与SO组相比较,其余各组BCL-2及BAX蛋白表达均明显上升,具有显著性差异(P<0.01)。IPC组、MD组及HD组BCL-2蛋白表达均高于IR组(P<0.01);IPC组BAX蛋白表达低于IR组(P<0.01);LD组、MD组、HD组与IR组之间BAX蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。
结论:通冠胶囊后适应的心肌保护作用可通过降低局部氧自由基生成,升高BCL-2 蛋白表达,提高BCL-2/BAX比值,抑制心肌细胞凋亡实现。通冠胶囊后适应可部分起到模拟 缺血后适应的作用,且作用程度与剂量具有相关性。