【摘 要】
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建立了同时测定大鼠胆汁中15种胆汁酸组分[游离型胆汁酸胆酸(CA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、去氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA),牛磺胆酸、甘氨胆酸及牛磺胆酸和甘氨胆
【机 构】
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苏州大学药学院; 苏州大学附属第二医院临床药理实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81603181);江苏省自然科学基金(BK20150302);苏州市2016年度产业技术创新专项-民生科技(SYSD2016149)
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建立了同时测定大鼠胆汁中15种胆汁酸组分[游离型胆汁酸胆酸(CA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、去氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA),牛磺胆酸、甘氨胆酸及牛磺胆酸和甘氨胆酸与CDCA、UDCA、DCA和LCA的结合型]的高效液相色谱-串联质谱联用方法。由于胆汁中各胆汁酸浓度较高且内源性成分复杂,因此首先需将胆汁进行稀释,并采用分阶段检测,在提高检测灵敏度的同时,能够减少基质效应对测定的影响。采用XTerra RP18色谱柱进行色谱分离,流动相为10 mmol/L乙酸铵溶液∶乙腈,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,于负离子模式下进行两阶段多反应检测。胆汁中15种胆汁酸成分能够在30 min内完成基线分离,最低定量限达到1 ng/ml。批内和批间RSD均<15%,低、中、高浓度质控胆汁样本的基质效应在86.28%～114.38%,提取回收率在85.32%～114.95%。以该方法同时测定正常Wistar大鼠胆汁中的胆汁酸谱,结果显示牛磺酸结合型胆汁酸是胆汁中的主要胆汁酸组分。
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