人参皂苷Rb1对紫外线损伤的保护作用及其机制研究

来源 :中华皮肤科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:b56240320
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目的 观察人参皂苷Rb1对中波紫外线(UVB)照射诱导小鼠表皮细胞、培养的HaCaT细胞产生与清除环丁烷嘧啶二聚体(CPD)的影响及对核苷酸切除修复蛋白XPC、ERCC1表达的影响.方法 42只去毛BALB/c小鼠分为4组:未处理组(6只),UVB组(12只),UVB+小剂量Rb1组(12只),UVB+大剂量Rb1组(12只).后2组照射前2h在背部按100 μl/cm2分别外用含0.5 g/L、2g/L人参皂苷Rb1的丙酮溶液,而前2组予以相应丙酮溶液.UVB剂量均为180 mJ/cm2,于照射后0.5、16 h分别处死半数小鼠,利用免疫组化法检测表皮CPD水平.培养的HaCaT细胞用含人参皂苷Rb1(5、20、50 mg/L)的培养基孵育4h,部分细胞于UVB照射(15、30 mJ/cm2)后0.5、12 h终止培养并提取基因组DNA,通过斑点杂交法检测CPD.其余细胞照射(30 mJ/cm2)后0、0.5、2、4、12h终止培养,提取细胞总蛋白,通过免疫印迹法分析XPC、ERCC1蛋白的表达.结果 UVB照射小鼠0.5 h后,各照光组表皮均产生大量CPD,但组间差异无统计学意义;在照射后16h,UVB+小剂量Rb1组、UVB+大剂量Rb1组表皮CPD分别为32.1±8.5、14.6±4.1,均较UVB组(67.3±11.2)显著减少,且大剂量组更为明显(P值均<0.01).HaCaT细胞在UVB照射后0.5 h,各组CPD总量差异无统计学意义,但照射后12h,给药组CPD水平明显降低.UVB组HaCaT细胞XPC、ERCC1蛋白的表达均随着时间延长不断下降,在照射后即刻、0.5、2、4、12 h,XPC/GAPDH蛋白灰度比值分别为0.68±0.11、0.47±0.09(与照射后即刻比较,P<0.05,下同)、0.45±0.08 (P<0.05)、0.37±0.06(P<0.01)、0.18±0.03(P<0.01),ERCC 1/GAPDH分别为0.28±0.03、0.25±0.03 (P> 0.05)、0.21±0.02 (P<0.05)、0.14±0.02 (P<0.01)、0.11±0.01(P<0.01);加入50 mg/L Rb1干预后,XPC、ERCC1蛋白的表达不断增加,XPC/GAPDH分别为0.56±0.07、0.48±0.14、0.68±0.15、0.97±0.20(P<0.01)、0.79±0.12(P<0.05),ERCC 1/GAPDH分别为0.27±0.04、0.24±0.04、0.29±0.05、0.35±0.05(P<0.05)、0.39±0.05(P<0.01).结论 人参皂苷Rb1对UVB诱导的CPD的产生无明显影响,但可显著加速其清除,这可能与其上调XPC、ERCC1蛋白的表达有关。

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