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目的 建立HSP90稳定高表达细胞系,探讨HSP90在应激适应中的作用及其机制。方法 含人类HSP90β全长基因的质粒pSmycHSP经酶切鉴定、大肠杆菌转化、质粒提取纯化后,以电穿孔转染,G418筛选建立HSP90稳定高表达的小鼠成纤维细胞系。通过免疫共沉淀方法,观察HSP90表达与底物蛋白HSP70、Raf-1的结合情况。结果 经G418筛选的阳性克隆HSP90 clone细胞HSP90胞膜、胞核强染。免疫共沉淀结果表明,细胞内HSP90含量、HSP90结合的Raf-1量、HSP90结合的HSP70量