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目的建立抗幽门螺杆菌(Hp)特异性抗体的ELISA检测方法,用于牛乳中抗Hp特异性抗体的检测。方法超声Hp全菌抗原接种奶牛,按多克隆抗体制备技术制备牛抗Hp抗血清。用纯化牛IgG免疫家兔,制备兔抗牛IgG多克隆抗体。硫酸铵盐析,DEAE32柱层析分别纯化牛与兔IgG。兔抗牛IgG以辣根过氧化物酶标记。用Hp全菌抗原包被反应板,建立间接ELISA法用于牛乳抗Hp抗体的检测。结果建立的抗Hp间接ELISA法的最佳包被抗原量为1.47μg/孔,HRP-兔抗牛IgG1:600稀释,标准曲线方程为A=0.0124+