【摘 要】
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目的:对比同源重组与Gibson Assembly两种方法构建腺病毒载体的效率。方法:增殖并提取AD4DNA,分别用同源重组与Gibson Assembly两种方法,将AD4 DNA镶嵌入p BR322质粒,构建出
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目的:对比同源重组与Gibson Assembly两种方法构建腺病毒载体的效率。方法:增殖并提取AD4DNA,分别用同源重组与Gibson Assembly两种方法,将AD4 DNA镶嵌入p BR322质粒,构建出携带有全长AD4DNA的腺病毒载体,并进行PCR和测序鉴定,对比两种方法构建腺病毒载体的筛选效率。结果:两种方法均能构建出正确的腺病毒载体;筛选同源重组法1 000个菌落中,鉴定360个,仅有1个菌落;Gibson Assembly法112个菌落数中,鉴定其中10个,有3个阳性。结论:Gibson Assembly方法比传统同源重组方法在构建腺病毒载体时更有效。
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